GPER-induced signaling is essential for the survival of breast cancer stem cells

G protein-coupled estrogen receptor-1 (GPER), a member of the G protein-coupled receptor (GPCR) superfamily, mediates estrogen-induced proliferation of normal and malignant breast epithelial cells. However, its role in breast cancer stem cells (BCSCs) remains unclear. Here we showed greater expression of GPER in BCSCs than non-BCSCs of three patient-derived xenografts of ER⁻/PR⁺ breast cancers. GPER silencing reduced stemness features of BCSCs as reflected by reduced mammosphere forming capacity in vitro, and tumor growth in vivo with decreased BCSC populations. Comparative phosphoproteomics revealed greater GPER-mediated PKA/BAD signaling in BCSCs. Activation of GPER by its ligands, including tamoxifen (TMX), induced phosphorylation of PKA and BAD-Ser118 to sustain BCSC characteristics. Transfection with a dominant-negative mutant BAD (Ser118Ala) led to reduced cell survival. Taken together, GPER and its downstream signaling play a key role in maintaining the stemness of BCSCs, suggesting that GPER is a potential therapeutic target for eradicating BCSCs.     

血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平与宫颈癌临床病理特征及预后的关系

目的:探讨血清鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）、细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)及血管内皮生长因子（VEGF）水平与宫颈癌临床病理特征及预后的关系。方法:选取2010年1月至2012年12月海南西部中心医院收治的146例宫颈癌患者、50例宫颈上皮内瘤病变（CIN）患者(CIN组)和50例正常健康女性(对照组)，比较各组血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平。分析宫颈癌患者血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平与临床病理特征的关系，采用Kaplan-Meier法分析不同临床病理特征患者生存率差异，多因素COX比例风险回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果:宫颈癌组血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平均明显高于CIN组和对照组［SCCA（ng/ml）:9.04±2.35 vs 1.91±0.62和0.65±0.14；CYFRA21-1（ng/ml）:5.48±1.62 vs 0.92±0.43和0.64±0.25；VEGF（pg/ml）:326.42±48.15 vs 125.48±23.60和108.62±18.73，均P＜0.01］。血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平与宫颈癌患者的临床分期、病理分级、淋巴结转移、浸润深度及脉管浸润相关（P＜0.05）。单因素及多因素COX回归分析显示，临床分期［HR（95%CI）:2.016（1.512～2.915）］、淋巴结转移［HR（95%CI）:4.013（2.937～6.016）］、SCC-Ag［HR（95%CI）:2.972（2.106～4.618）］、CYFRA21-1［HR（95%CI）:1.704（1.335～2.519）］及VEGF［HR（95%CI）:2.116（1.685～3.164）］阳性表达是宫颈癌患者预后不良的危险因素。结论:宫颈癌患者血清SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF水平明显升高，SCC-Ag、CYFRA21-1及VEGF阳性表达是影响宫颈癌患者预后不良的危险因素。     

Differential Expression of PD-L1 Between Sporadic and VHL-Associated Hereditary Clear-Cell Renal Cell Carcinoma and Its Correlation With Clinicopathological Features

Background

Programmed death ligand-1 (PD-L1) is a potential predictive biomarker for immunotherapy in several malignancies. However, the expression level and clinical significance of PD-L1 in von Hippel–Lindau (VHL)-associated hereditary clear-cell renal cell carcinoma (ccRCC) remain unclear.

UPLC-MS/MS测定人痰液中异烟肼、吡嗪酰胺和左氧氟沙星的浓度

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测痰液中3种药物异烟肼(isoniazid,INH)、左氧氟沙星(levofloxacin,LFX)和吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)浓度的方法,冒在为实现临床个体化用药提供帮助。方法痰液样品离心后经甲醇/乙腈蛋白沉淀法预处理后进样液质联用仪进行分析。实验采用的流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈;流速0.35mL·min^-1;采用ACQUITY UPLAC HSS T31.8μm column(2.1mm×100mm,Waters公司)分离;采用电喷零电离源,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式对待测物进行正离子扫描检测。此外,本试验盲态收集5例患者的痰液,用该法进行定量分析。结果测得痰液中INH、PZA和LFX分别在48~6000 ng·mL^-1(r=0.9988)、480~60000 ng·mL^-1(r=0.9993)、120~15000 ng·mL^-1(r=0.9995)内表现出良好的线性关系。INH、PZA和LFX 3种药物的日内和日间精密度均低于15%,且3种药物的提取回收率均处于97.21%~107.80%之间。7例受试者体内均检测到药物INH,质量浓度分别为44.74、120.1、301.5、481、595.5、1220及1570 ng·mL^-1;PZA的质量浓度分别为104.2、6273.34和3185 ng·mL^-1;1例受试者检出LFX,质量浓度为199.86 ng·mL^-1。结论本试验建立了痰液中INH、PZA及LFX的检测方法,具有灵敏度高、测定结果准确、快速等诸多优点,可以应用于临床治疗药物的监测。     

主观疗效评价在恶性肿瘤中医药研究中的应用现状及进展

循证医学模式的引入使得恶性肿瘤中医治疗的有效性有了新的阐述途径,同时也对中医疗效评价体系提出了更高的要求。基于患者的自身感受,医师望闻问切四诊等得到的主观信息是主观疗效评价的重要组成方面,一直以来都是中医疗效评价的重要手段,其由单一的症状是否好转的评价发展至多重症状是否改善、整体生活质量是否提高等的评价方式,主观疗效评价的方式越来越丰富,也越来越规范,文章就目前主观疗效评价在中医药领域的研究现状及进展展开综述。     

甘草种子与种苗质量分级标准研究

目的:研究甘草种子、种苗质量分级标准,为甘草药材规范化生产奠定基础。方法:以全国主产区所流通的甘草种子、种苗为样本,通过收集种子的发芽率、净度、含水量、千粒质量,种苗的根长、芦头直径和百株质量等指标信息,采用K-均值聚类分析法、标准差法、平均值法并结合生产实践对甘草种子、种苗进行分级,并开展田间栽培比较试验,对等级划分的合理性进行验证。结果:甘草种子质量等级划分为3个等级,各级甘草种子的千粒质量不低于8 g,含水量不低于10%,一级种子:发芽率≥90%,净度≥90%;二级种子:90%>发芽率≥85%,90%>净度≥85%;三级种子:85%>发芽率≥80%,85%>净度≥80%。甘草种苗质量等级划分为3个等级,一级种苗:根长≥45 cm,芦头直径≥0.8 cm,1.3 kg≤百株质量<0.8 kg;二级种苗:45 cm>根长≥35 cm,0.8 cm>芦头直径≥0.6 cm,0.8 kg≤百株质量<0.4 kg;三级种苗:35 cm>根长≥25 cm,0.6 cm>芦头直径≥0.4 cm,0.4 kg≤百株质量≤0.2 kg。结论:经验证,甘草种子、种苗质量等级划分合理,便于生产实践应用。     

五味子醇甲对APP/PS1小鼠学习记忆和NF-κB p65的影响

目的研究五味子醇甲(SCH)对APP/PS1双转基因痴呆小鼠行为学和NF-κB p65的影响。方法将35只APP/PS1双转基因痴呆小鼠随机分为模型(APP/PS1)组、五味子醇甲(SCH+APP/PS1)组;另以同背景同月龄的C 57 BL/6 J阴性小鼠为空白(WT)组。SCH+APP/PS1组给予SCH悬浊液灌胃(2.6 mg·kg^-1·d^-1),模型组和空白组给予等量蒸馏水灌胃。各组灌胃30 d进行Mirror水迷宫空间探索试验后取材。HE染色法观察皮层及海马CA1区神经细胞的形态结构。运用DCFH-DA法检测脑组织活性氧(ROS)含量。Western印迹检测法检验磷酸化核转录因子(NF-κB p65,pp65)的表达。结果与APP/PS 1组相比,APP/PS 1+SCH组有效区停留距离及时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);APP/PS 1+SCH组穿越有效区次数和平台区停留距离增加,均差异有统计学意义(P<0.01)。APP/PS 1+SCH组HE染色观察皮层有部分神经细胞萎缩、减少,较APP/PS1组明显好转,海马细胞排列整齐度尚可、较均匀。与APP/PS1组相比,APP/PS1+SCH组能降低ROS含量,差异有统计学意义(P<0.05)。APP/PS 1+SCH组皮层及海马pp65蛋白相对表达量下调(P<0.05,P<0.01)。结论SCH可能通过降低ROS含量和抑制pp65保护脑组织形态结构和提高APP/PS1鼠空间探索记忆能力。